Khi thực hiện tiêm tinh trùng vào bào tương noãn (ICSI), tinh trùng thường được lựa chọn dựa trên độ di động và hình dạng được xác định dưới kính hiển vi. Tuy nhiên, quy trình thông thường này vẫn cho phép lựa chọn các tinh trùng có phân mảnh DNA. Mức độ phân mảnh DNA tinh trùng cao (SDF) đã được báo cáo có liên quan đến sự giảm tỷ lệ thụ tinh, sự phát triển kém của phôi và tỉ lệ thai thấp. Vì vậy, lựa chọn tinh trùng không phân mảnh DNA hoặc số lượng phân mảnh ít nhất có thể là một vấn đề quan trọng của ICSI trong tương lai và có thể cải thiện chất lượng phôi cũng như kết quả lâm sàng. Hiện nay, có các phương pháp để kiểm tra SDF như phương pháp Terminal deoxynucleotidyl transferase dUTP nick end labeling - TUNEL, Sperm chromatin dispersion - SCD. Tuy nhiên, tinh trùng được thử nghiệm bằng các kỹ thuật này không thể sử dụng vì chúng được xử lý bằng cách cố định và nhuộm màu. Do đó, các kỹ thuật không xâm lấn để chọn một tinh trùng sống riêng lẻ mà không phân mảnh DNA là rất cần thiết. Xét nghiệm hypo-osmotic swelling test (HOST) là một xét nghiệm về sự sống đơn giản được sử dụng để đánh giá chức năng màng đuôi của tinh trùng. Khi các mẫu tinh dịch được ủ trong dung dịch nhược trương, đuôi của tinh trùng sẽ phồng hoặc không bị phồng. Tinh trùng có thể chia thành 6 loại theo 6 kiểu phồng đặc trưng là tinh trùng loại “b”-“g”. Tinh trùng loại “b”–“g” biểu hiện cho chức năng màng tế bào khỏe mạnh và do đó những tinh trùng này được coi là sống. Các tinh trùng trải qua HOST có thể được sử dụng trực tiếp trong ICSI vì quá trình này không gây hại cho đầu hoặc cổ của tinh trùng. Một nghiên cứu đã cho thấy kết quả phân loại của HOST tương quan với độ di động của tinh trùng, tỷ lệ hình dạng bình thường và mức SDF. Các loại tinh trùng “d”, “e” và “f có mức độ SDF thấp hơn đáng kể so với các loại tinh trùng “a” và “g”. Trong một nghiên cứu khác, mức SDF (được đánh giá theo phương pháp TUNEL) ở mức thấp nhất là loại tinh trùng “b” (3,9%), thấp hơn đáng kể so với loại “a” (16,8%) hoặc “g” (13%). Tuy nhiên, trong các nghiên cứu đó, tinh trùng được thử nghiệm trong tinh dịch thô chưa được xử lý để sử dụng cho ICSI. Do đó, Sung Woo Kim và cộng sự tiến hành đánh giá tình trạng phân mảnh DNA với tinh trùng riêng lẻ theo hình dạng phồng đuôi đặc trưng quan sát được thông qua hypo-osmotic swelling test (HOST) với mẫu đã được xử lý.



Nghiên cứu tiến hành trên 21 mẫu tinh dịch đông lạnh của 21 nam giới khỏe mạnh. Mẫu được rã đông và xử lý bằng phương pháp swim-up. Các mẫu sau khi xử lý được thực hiện quy trình HOST và khảo sát mức độ phân tán chất nhiễm sắc của tinh trùng (Sperm Chromatin Dispersion - SCD) bằng cách sử dụng Halosperm kit. Tình trạng phân mảnh DNA và kiểu phồng đuôi đặc trưng (“a”–“g”) được đánh giá với tinh trùng riêng lẻ. Tổng số 42.000 tinh trùng đã được phân tích và tỷ lệ tinh trùng không phân mảnh DNA được đánh giá theo các mẫu phồng đuôi đặc trưng.

Kết quả cho thấy, hơn 93% tinh trùng trên tất cả các loại không có sự phân mảnh DNA. Tỷ lệ tinh trùng không có sự phân mảnh DNA là 100% ở loại “d”, 98,67% ở loại “g” và 98,17% ở loại tinh trùng “f”.

Nghiên cứu cho thấy, các tinh trùng kiểu “d” tương quan với không có sự phân mảnh DNA, bên cạnh đó các loại khác cũng tương quan với tỷ lệ phân mảnh DNA rất thấp. Vì vậy, HOST nên là một quy trình thường quy trong ICSI để lựa chọn tinh trùng nguyên vẹn, không phân mảnh DNA. Tuy nhiên, một hạn chế của nghiên cứu này là tinh trùng chỉ được lấy từ nam giới bình thường và tất cả các mẫu đã được đông lạnh. Vì vậy, cần có các nghiên cứu sâu hơn để xác định mối tương quan giữa HOST và mức SDF trong nam giới vô sinh, hiếm muộn hoặc trong tinh trùng tươi, không đông lạnh.

CVPH. Nguyễn Thị Thu Thảo - IVFMD Bình Dương

Nguồn: Sung Woo Kim (2019, Specific tail swelling pattern in hypo-osmotic solution as a predictor of DNA fragmentation status in human spermatozoa, The korean society for reproductive medicine. https://doi.org/10.5653/cerm.2019.00458.