CN. Phạm Diệp Vũ Khang, ThS. Nguyễn Huyền Minh Thụy – IVF Tâm Anh
 
Tổng quan
Vô tinh được định nghĩa là tình trạng không có tinh trùng trong mẫu tinh dịch, ảnh hưởng đến 1% nam giới và 10-15% bệnh nhân vô sinh. Hơn nữa, khoảng 60% nam giới bị vô tinh rơi vào trường hợp vô tinh không bế tắc (non-obstructive azoospermia - NOA) xảy ra do những khiếm khuyết nghiêm trọng trong quá trình sinh tinh. Đông lạnh tinh trùng là phương pháp bảo quản hiệu quả để tránh việc sinh thiết mô tinh hoàn nhiều lần. Các phương pháp đông lạnh tinh trùng thông thường không phù hợp trong những trường hợp này do số lượng tinh trùng bị thất thoát trong quá trình đông lạnh và rã đông. Do đó, khái niệm đông lạnh tinh trùng đơn (single sperm cryopreservation - SSC) bằng màng trong suốt được đề xuất.
 
Sau đó, nhiều thiết bị và phương pháp đông lạnh khác nhau đã được thiết kế để tăng cơ hội thụ tinh đối với những trường hợp số lượng tinh trùng ít. Trong những trường hợp này, mẫu tinh trùng lấy từ mô tinh hoàn thường có ít hoặc không có khả năng di động gây ảnh hưởng tiêu cực đến kết quả lâm sàng. Do đó, cần phải tìm ra một phương pháp để lựa chọn tinh trùng sống trước khi đông lạnh nhằm tối ưu hóa kết quả rã đông.
 
Pentoxifylline (PTX) là một phương pháp chọn lọc tinh trùng chưa được sử dụng trong kỹ thuật SSC. Mục đích chính của nghiên cứu này là tìm hiểu tác động của PTX lên khả năng di động, hình thái, khả năng sống, phân mảnh DNA và điện thế màng ty thể của tinh trùng trước và sau khi SSC.
 
Phương pháp
Nghiên cứu này được thực hiện từ ngày 22 tháng 6 năm 2023 đến ngày 28 tháng 9 năm 2023 tại Viện Khoa học Sinh sản Yazd (Iran) và bao gồm 2 giai đoạn.
Giai đoạn 1
Các mẫu tinh trùng từ tinh hoàn thu được bằng TESE và micro-TESE từ 20 người đàn ông vô tinh và được chia thành hai nhóm thử nghiệm SSC không sử dụng PTX (nhóm chứng) và SSC sử dụng PTX (nhóm PTX).

• Ở nhóm đối chứng, 20 tinh trùng được chọn ngẫu nhiên và đặt trong môi trường HOS để xác định tỷ lệ sống của tinh trùng. Các tinh trùng còn lại được đông lạnh.
• Ở nhóm PTX, tinh trùng được chọn và chuyển vào các giọt PTX ở 37^oC trong 30 phút, chỉ những tinh trùng di động được chọn để SSC.

Giai đoạn 2
Tinh trùng được chọn từ các mẫu TESE và micro-TESE từ 10 người đàn ông vô tinh. Khoảng hơn 100 tinh trùng từ tinh hoàn được chọn và đông lạnh bằng kỹ thuật SSC. Các mẫu được chọn ngẫu nhiên để rã đông trong môi trường rửa tinh trùng không có PTX (đối chứng) hoặc trong môi trường rửa tinh trùng có PTX (nhóm PTX) cùng nồng độ với giai đoạn 1.
Phân tích thống kê được thực hiện bằng phần mềm SPSS (phiên bản 20).
 
Kết quả
Giai đoạn 1 (sử dụng PTX trước khi đông lạnh)

Tỷ lệ di động sau khi rã đông ở nhóm PTX cao hơn nhóm chứng (25,65 ± 8,13 so với 0,85 ± 2,10, p > 0,001). Tỷ lệ thu hồi, tỷ lệ sống, hình thái tinh trùng, tỷ lệ phân mảnh DNA tinh trùng, điện thế màng ty thể không khác biệt giữa 2 nhóm.

Giai đoạn 2 (sử dụng PTX sau đông lạnh)

Mặc dù khả năng di động của tinh trùng tăng lên ở nhóm PTX so với nhóm chứng (29,30 ± 12,73 so với 1,90 ± 2,64, p > 0,001) nhưng tỷ lệ sống không khác biệt (70,40 ± 12,12 so với 65,30 ± 11,87, p > 0,001). Các chỉ số khác tương tự kết quả ở giai đoạn 1.

 
Bàn luận
Việc đông lạnh tinh trùng bằng kỹ thuật SSC mang lại hiệu quả về mặt thời gian. Bên cạnh đó, việc sử dụng PTX có thể cải thiện đáng kể khả năng di động của tinh trùng từ tinh hoàn. Trong nghiên cứu này, khi cho tinh trùng tiếp xúc với PTX trước và sau khi đông lạnh giúp cải thiện khả năng di động của tinh trùng. Sự tương đồng về tỷ lệ sống cho thấy PTX không gây ra những tác hại cho tinh trùng sau khi đông lạnh.
 
Ở giai đoạn 2 có 26% tinh trùng di động sau khi rã trong PTX, trong khi tỷ lệ sống là hơn 60%. Có lẽ tổn thương lạnh làm cho hầu hết tinh trùng sống không thể di chuyển sau khi tiếp xúc với PTX. Do đó, sử dụng PTX sau SSC với số lượng tinh trùng ít không hiệu quả để lựa chọn tinh trùng sống.
 
Kết luận
Việc bổ sung PTX với nồng độ phù hợp trước khi SSC đối với mẫu tinh trùng từ tinh hoàn có thể là một phương pháp chọn lọc tinh trùng sống mà không làm tăng các tác động bất lợi của tổn thương lạnh. Tuy nhiên, sử dụng PTX sau rã đông với số lượng tinh trùng ít không hiệu quả để chọn lọc tinh trùng sống.
 
Tài liệu tham khảo
LORIAN, Keivan, et al. Pentoxifylline treatment as a safe method for selecting viable testicular spermatozoa before cryopreservation of a small numbers of spermatozoa in azoospermia individuals. Archivio Italiano di Urologia e Andrologia, 2024, 96.2. https://doi.org/10.4081/aiua.2024.12525

Từ khóa: Vô tinh không bế tắc, pentoxifylline, tinh trùng từ tinh hoàn, đông lạnh tinh trùng đơn lẻ.