CVPH. Nguyễn Thị Thu Thảo - IVFMD Bình Dương

Hiện nay, vô sinh do các yếu tố liên quan đến nam giới dao động từ 20% đến 70% trên toàn thế giới. Nguyên nhân chính của vô sinh nam là sự suy giảm chức năng tinh trùng. Nghiên cứu ngày nay cho thấy stress oxy hóa là một trong những nguyên nhân gây vô sinh nam. Bên cạnh đó, chất chống oxy hóa giúp tinh trùng chống lại sự stress oxy hóa. Do đó, ngày nay việc bổ sung các chất chống oxy hóa như một chất bổ sung trong môi trường cấy tinh trùng là một chiến lược để bảo tồn tốt hơn chất lượng tinh trùng. Penicillamine là một chống oxy hóa, bổ sung trong môi trường cấy đã được chứng minh có tác dụng có lợi với bảo tồn tinh trùng ngựa trong vài ngày ở nhiệt độ phòng, tuy nhiên, tác dụng có lợi của nó đối với tinh trùng người in vitro tiếp xúc với stress oxy hóa chưa được nghiên cứu. Do đó, Pamela Uribe và cộng sự tiến hành nghiên cứu đánh giá tác dụng của penicillamine đối với tinh trùng người in vitro tiếp xúc với stress oxy hóa.



Nghiên cứu thực hiện đánh giá tác dụng của penicillamine với 2 trường hợp là tinh trùng từ các nam giới Normozoospermic và tinh trùng tiếp xúc với stress oxy hóa gây ra bởi ionomycin và hydro peroxide (H₂O₂). Các mẫu tinh dịch sau khi thu nhận được chọn lọc thông qua kỹ thuật Swim-up. Với trường hợp đánh giá tác dụng của penicillamine đối với mẫu từ các nam giới Normozoospermic, mẫu được tiếp xúc với môi trường có penicillamine với nồng độ từ 1 đến 30 mM trong 1 giờ ở 37°C. Một phần của tinh trùng không được điều trị được sử dụng làm đối chứng. Sau đó, tinh trùng được rửa một lần bằng cách ly tâm ở 500 vòng/5 phút. Tỉ lệ sống, điện thế màng ty thể (MMP) và độ di động đã được đánh giá. Với trường hợp đánh giá tác dụng của penicillamine đối với tinh trùng người bị stress oxy hóa, mẫu được tiếp xúc với môi trường có 1 μM ionomycin hoặc 2 mM H₂O₂ và nồng độ penicillamine (1 đến 30 mM) trong 1 giờ ở 37°C. Một mẫu tinh trùng không được điều trị và một mẫu được điều trị với các chất gây stress oxy hóa (có tiếp xúc với ionomycin và H₂O₂ nhưng không sử dụng penicillamine) được sử dụng làm đối chứng. Sau đó, tinh trùng được rửa bằng cách ly tâm ở 500 vòng/5 phút. ROS, tỉ lệ sống, MMP và độ di động được đánh giá. Trong trường hợp tinh trùng tiếp xúc với H₂O₂, lượng ATP cũng được phân tích.

Kết quả cho thấy, mẫu tinh trùng từ nam giới Normozoospermic tiếp xúc với penicillamine lên đến 30 mM trong 1 giờ ở 37°C không ảnh hưởng đến tỷ lệ sống của tinh trùng, MMP và độ di động tiến tới. Những kết quả này cho thấy nồng độ penicillamine được sử dụng trong môi trường của nghiên cứu là vô hại đối với tinh trùng. Khi đánh giá tác dụng của penicillamine đối với tinh trùng tiếp xúc với stress oxy hóa do ionomycin hay H₂O₂ gây ra, kết quả cho thấy, penicillamine làm giảm đáng kể nồng độ ROS với ≥ 10 mM penicillamine. Bên cạnh đó, tỷ lệ sống của tinh trùng giảm khi tiếp xúc với ionomycin, nhưng cao hơn đáng kể đối với tất cả nồng độ penicillamine. Hơn nữa, với nồng độ ≥ 10 mM penicillamine, tỷ lệ sống không khác biệt đáng kể so với mẫu đối chứng không điều trị. Khi sử dụng H₂O₂, tỷ lệ sống của tinh trùng không giảm (97,1 ± 1,7 so với 97,8 ± 0,1; p> 0,05). Do đó, có thể thấy rằng ảnh hưởng do H₂O₂ tạo ra ít gây hại hơn so với ionomycin. Tương tự, MMP giảm ở mẫu được điều trị bằng ionomycin/H₂O₂ và cao hơn khi bổ sung ≥ 10 mM penicillamine. Bên cạnh đó, điều trị bằng ionomycin/ H₂O₂ làm giảm độ di động tiến tới của tinh trùng và độ di động được cải thiện cao hơn với ≥10 mM penicillamine. Ngoài ra, lượng ATP giảm ở trường hợp mẫu tiếp xúc với H₂O₂ và bình thường khi bổ sung môi trường có ≥ 10 mM penicillamine.

Nghiên cứu cho thấy, penicillamine bổ sung trong môi trường cấy tinh trùng có thể làm giảm nồng độ ROS do ionomycin và H₂O₂ gây ra; từ đó giúp việc bảo quản tốt hơn MMP, độ di động, tỷ lệ sống và ATP. Do đó, penicillamine bổ sung trong môi trường cấy tinh trùng có tiềm năng đặc biệt đối với các mẫu tinh dịch có nồng độ ROS cao và những trường hợp xử lý trong in vitro có thể làm tăng sản xuất ROS bao gồm trữ đông hoặc trì hoãn ICSI hay IVF.

Nguồn: Pamela Uribe (2020). “Antioxidant effects of penicillamine against in vitro-induced oxidative stress in human spermatozoa”, Blackwell Verlag GmbH, DOI: 10.1111/and.13553.