CNSH. Nguyễn Thị Ngọc Huệ - IVFMD Bình Dương

Các điều kiện nuôi cấy phôi như nhiệt độ, nồng độ khí, loại môi trường, độ ẩm, độ thẩm thấu là những yếu tố cần thiết và được kiểm soát chặt chẽ nhằm đảm bảo cho sự phát triển của phôi đến giai đoạn phôi nang, trong đó bao gồm thông số về pH ngoại bào (pH môi trường nuôi cấy - pHe). Độ pH trong khoảng 7,2 - 7,4 đã được đề xuất để đảm bảo sự phát triển của phôi và giá trị này phụ thuộc vào từng hãng môi trường khác nhau. Giá trị của pHe có thể thay đổi tùy theo phương pháp đo, tỉ lệ phần trăm và chất lượng khí CO₂ đã được cài đặt trong tủ cấy, loại và nồng độ hệ đệm, nhiệt độ và độ cao của trung tâm so với mực nước biển. Tất cả các điều kiện nuôi cấy phôi đều có tác động đến khả năng tồn tại của tế bào, đặc biệt là trên ti thể - nơi cung cấp ATP cho nhiều hoạt động khác nhau, sự thiếu hụt ti thể có thể tác động tiêu cực đến khả năng thụ tinh, phân chia tế bào và phân li nhiễm sắc thể. Theo hướng dẫn của Hiệp hội Sinh Sản và Phôi học người Châu Âu (European Society of Human Reproduction and Embryology - ESHRE), môi trường có hệ đệm bicacbonat nên sử dụng nồng độ CO₂ trong tủ cấy từ 5-7%. Dù vậy, không có giá trị pHe tối ưu trong nuôi cấy phôi.  Hiện tại, CO₂ được chấp nhận sử dụng rộng rãi nhưng chưa có nghiên cứu nào sử dụng noãn của một bệnh nhân để đánh giá nồng độ CO₂ thích hợp nhất trong nuôi cấy phôi. Nghiên cứu này được thực hiện để phân tích mối liên hệ giữa nồng độ CO₂ 6% và 7% cũng như pHe khác nhau đến sự phát triển của phôi nang và tỉ lệ phôi nguyên bội từ noãn của một bệnh nhân.
 
Nghiên cứu hồi cứu được thực hiện từ tháng 7 - 2018 đến tháng 10 - 2019 trên 604 noãn MII của 44 chu kì ICSI kết hợp PGT-A. Noãn của một bệnh nhân được chia thành hai nhóm: nhóm nuôi cấy ở nồng độ CO₂ 6,0%  (pHe = 7,374 ± 0,014)  và nhóm nuôi cấy ở nồng độ CO₂ 7,0% (pHe = 7,300 ± 0,013), 5,0% O₂ và 89,0% hoặc 88,0% N₂. Sử dụng môi trường Global Total LP và nuôi cấy trong tủ G185 K-SYSTEM. Các biến phân tích là noãn thụ tinh bình thường (2PN), tỉ lệ phôi phân chia, tỉ lệ phôi nang, tỉ lệ phôi nang hữu dụng (phôi sinh thiết/2PN), và tỉ lệ phôi nguyên bội. Phôi nang được sinh thiết vào ngày thứ 5, thứ 6, hoặc 7 để phân tích di truyền và định lượng DNA ty thể (mtDNA) bằng phương pháp giải trình tự thế hệ mới.
 
Kết quả từ nghiên cứu:
- Không có sự khác biệt nào giữa nhóm CO₂ 6,0% và 7,0% về tỉ lệ thụ tinh bình thường và tỉ lệ phôi phân chia, tương ứng 72,3% so với 67,1%, p = 0,169 và 96,6% so với 96,3%, p = 0,897.
- Tỉ lệ phôi nang tương đương  giữa nhóm CO₂ 6,0% và 7,0% (68,1% so với 64,2%, p = 0,409).
- Mặc dù tỉ lệ phôi nang hữu dụng không có sự khác biệt ở hai nhóm (54,3% so với 55,3%, p = 0,922), tổng tỉ lệ phôi nguyên bội giảm đáng kể khi so sánh giữa nhóm CO₂ 6,0% và 7,0%, tương ứng 58,7% so với 42,8%, p = 0,01.
- mtDNA trung bình của phôi thấp hơn đáng kể ở nhóm CO₂ 6,0% so với 7,0%, tương ứng 30,4 ± 9,1 so với 32,9 ± 10,3, p = 0,037.
 
Các kết quả từ nghiên cứu cho thấy sự phát triển phôi nang không bị ảnh hưởng khi phôi được nuôi cấy ở nồng độ CO₂ 6,0% hoặc 7,0%, trong khi đó tỉ lệ phôi nguyên bội giảm đáng kể ở nồng độ CO₂ cao hơn, tương ứng ở pHe thấp hơn. Cuối cùng, nhóm tác giả đề nghị mỗi trung tâm IVF nên xác định nồng độ CO₂ tối ưu nhằm đảm bảo kết quả nuôi cấy phôi tốt nhất.
 
Tài liệu tham khảo:
Abdala A, Elkhatib I, Bayram A và cộng sự. Different CO₂ settings (6.0% vs 7.0%) do have an impact on extracellular pH of culture medium (pHe) and euploidy rates rather than on blastocyst development: a sibling oocyte study. J Assist Reprod Genet. 2021 Aug 26; 1-9.

Từ khóa: Thiết lập nồng độ CO2 khác nhau (6,0% so với 7,0%) ảnh hưởng đến pH của môi trường nuôi cấy (pHe) và tỉ lệ phôi nguyên bội hơn sự phát triển của phôi nang: một nghiên cứu chia noãn